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| BIOL0806-1 | Biologie cellulaire et méthodes de visualisation
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| Durée : | 25h Th, 25h Pr |
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| Crédits/ECTS : |
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| Titulaire(s) : | Patrick Motte, Marc Thiry |
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| Langue : | Langue française |
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| Aperçu général : | 1. Imagerie moléculaire et dynamique (P. Motte)
Partie 1. Outils d'imagerie
· Fluorescence, épifluorescence
· Confocalité, multiphoton, détecteurs, déconvolution
Partie 2. Localisation dynamique moléculaire
· Du gène à la protéine
· Les AFPs ; approches de perte de fluorescence (FRAP, iFRAP, FLIP) ; les interactions protéine-protéine (FRET, BiFC) ; Fluorescence Correlation spectroscopy (FCS) et Fluorescence Lifetime Imaging
2. Cytochimie ultrastructurale (M. Thiry)
· Introduction : le microscope électronique à transmission
· Les différentes méthodes cytochimiques (DNA : la réaction de Feulgen, la réaction à l'ammine d'osmium ; RNA : test de Brachet, coloration à l'EDTA de Bernhard ; Protéines acides et basiques ; Polysaccharides : PAS, TCH)
· Les complexes-gold : lectin-gold, enzyme-gold, ..
· L'autoradiographie à haute résolution
· Les méthodes immunocytologiques et la cryo-immunocytologie
· Les techniques de la biologie moléculaire adaptées en ME : L'hybridation, la méthode Tunnel, la nick-translation, la transcription in situ |
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| Objectif du cours : | Visualiser les (macros)molécules et édifices macromoléculaires ainsi que leurs interactions dans le temps et dans l'espace est essentiel pour la compréhension de la physiologie des systèmes biologiques : de l'organisation même de la cellule au développement complexe des organismes. L'imagerie moléculaire actuelle présente des possibilités étendues -de l'ordre du nanomètre et de la milliseconde- et est utilisée dans l'étude de la dynamique de certains processus d'intérêt dans des cellules vivantes et fonctionnelles et dans différentes situations physiologiques et de stress. Les avancées considérables dans le domaine de la biologie cellulaire se croisent continuellement aux propres avancées technologiques. Celles-ci incluent la confocalité, le multiphoton, les détecteurs de haute résolution et haute sensibilité, la cryomicroscopie, la tomographie en microscopie électronique, la déconvolution, etc. Le cours aura pour objectif d'enseigner brièvement les outils d'imagerie et d'approfondir les applications de l'imagerie dans l'étude de la cellule et dans le domaine de la biologie du développement. |
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| Pré-requis : | Physiologie cellulaire et notions de base en microscopie. |
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| Travaux pratiques : | A définir. |
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| Organisation : | Lundi : cours - TPs
Mardi : cours - TPs
Mercredi : cours - TPs
Jeudi : préparation/discussion
Vendredi : présentation article |
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| Notes de cours : | Copie des diaporamas Power Point projetées. Un nombre minimum de 3 étudiants conditionnera l'organisation de la semaine de cours. |
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| Evaluation : | L'examen consistera en une présentation d'un article scientifique. Les modalités de l'évaluation seront définies avec les étudiants. |
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| Contacts : | Prof. Patrick MOTTE, tél : 043663810 Email: patrick.motte@ulg.ac.be
Prof. Marc THIRY, tél : 043665169 Email : mthiry@ulg.ac.be |
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