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| GENE0001-5 | Génie génétique
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| Durée : | 20h Th |
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| Nom du professeur : | Jacques Dommes |
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Langue(s) du cours :
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| Langue française |
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Organisation et évaluation :
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| Enseignement au premier quadrimestre, examen en janvier |
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Contenus du cours :
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| 1. Introduction
- Définitions
- Rappels de biologie moléculaire
2. Manipulation des fragments d'ADN
- Isolement de fragments d'ADN
- Modification de fragments d'ADN
- Ligation de fragments d'ADN
- Identification et caractéristiques de fragments d'ADN
3. Génie génétique des Procaryotes
- Vecteurs primaires pour le clonage dans Escherichia coli
- Vecteurs hybrides
- Rappels sur le fonctionnement des gènes procaryotes
- Vecteurs d'expression pour la production de protéines hétérologues chez E. coli
- Clonage et expression dans les bactéries Gram+
4. Construction et criblage de librairies d'ADN (J. Dommes)
- Nombre de clones dans une librairie
- Construction d'une librairie
- Identification (sélection par complémentation, marqueurs de sélection)
- Criblage d'une banque par hybridation
- Criblage par détection d'une protéine
5. Mutagenèse dirigée (J. Dommes)
- Mutagenèse aléatoire
- Mutagenèse dirigée via des oligonucléotides synthétiques
6. Applications particulières de la PCR (J. Dommes)
- Rappels
- Diagnostique
- Séquençage
- Modification de fragments d'ADN
- Analyse de mutations ponctuelles
- PCR inverse
- RT-PCR
- PCR quantitative
7. Génie génétique des levures et champignons filamenteux (J. Dommes)
- Techniques de transformation des levures
- Vecteurs utilisés chez Saccharomyces cerevisiae
- Vecteurs utilisés chez Kluyveromyces
- Levure méthylotrophes (Pichia, Hansenula)
- Sécrétion chez les levures
- Principaux problèmes d'expression de protéines recombinantes chez les levures
- Champignons filamenteux |
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Acquis d'apprentissage (objectifs d'apprentissage) du cours :
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- Acquisition de connaissances de base sur les techniques de transgenèse.
- Appréhension des potentialités du génie génétique dans l'étude du fonctionnement des organismes,
ainsi que dans l'amélioration des espèces utilisées par l'homme et pour la production de protéines recombinantes.
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Prérequis et corequis / Modules de cours optionnels recommandés :
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| Biologie moléculaire et génétique (cours de bachelier en biologie). |
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Activités d'apprentissage prévues et méthodes d'enseignement :
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Mode d'enseignement (présentiel ; enseignement à distance) :
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| Cours durant le premier quadrimestre. |
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Lectures recommandées ou obligatoires et notes de cours :
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| Présentations Powerpoint et notes de cours mises à la disposition des étudiants via la plateforme eCampus.
L'ouvrage suivant peut être utile, mais n'est pas indispensable :
Principles of Gene Manipulation and Genomics, S.B. Primrose and R.M. Twyman, 7th edition, Blackwell, ISBN13 : 978-1-4051-3544-3 |
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Modalités d'évaluation et critères :
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| Examen oral en première comme en seconde session. |
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Stage(s) :
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Remarques organisationnelles :
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Contacts :
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| - Prof. J. Dommes (j.dommes@ulg.ac.be) |
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