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| GENE0001-3 | Génie génétique
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| Durée : | 30h Th, 20h Pr |
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| Nombre de crédits : |
| Master en biochimie et biologie moléculaire et cellulaire, à finalité approfondie, 1re année | | Premier quadrimestre | | 4 |
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| Master en biochimie et biologie moléculaire et cellulaire, à finalité didactique, 1re année | | Premier quadrimestre | | 4 |
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| Master en biochimie et biologie moléculaire et cellulaire, à finalité spécialisée en bio-industrie, 1re année | | Premier quadrimestre | | 4 |
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| Master en biochimie et biologie moléculaire et cellulaire, à finalité spécialisée en biochimie industrielle, 1re année | | Premier quadrimestre | | 4 |
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| Master en biochimie et biologie moléculaire et cellulaire, à finalité spécialisée en bioinformatique et modélisation, 1re année | | Premier quadrimestre | | 4 |
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| Master en sciences biologiques | | Premier quadrimestre | | 4 |
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| Nom du professeur : | Jacques Dommes, Jacques Dommes |
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| Coordinateur(s) : | Jacques Dommes |
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Langue(s) du cours :
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| Langue française |
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Contenus du cours :
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| 1. Introduction
- Définitions
- Rappels de biologie moléculaire
2. Manipulation des fragments d'ADN
- Isolement de fragments d'ADN
- Modification de fragments d'ADN
- Ligation de fragments d'ADN
- Identification et caractéristiques de fragments d'ADN
3. Génie génétique des Procaryotes
- Vecteurs primaires pour le clonage dans Escherichia coli
- Vecteurs hybrides
- Rappels sur le fonctionnement des gènes procaryotes
- Vecteurs d'expression pour la production de protéines hétérologues chez E. coli
- Clonage et expression dans les bactéries Gram+
4. Construction et criblage de librairies d'ADN
- Nombre de clones dans une librairie
- Construction d'une librairie
- Identification (sélection par complémentation, marqueurs de sélection)
- Criblage d'une banque par hybridation
- Criblage par détection d'une protéine
5. Mutagenèse dirigée
- Mutagenèse aléatoire
- Mutagenèse dirigée via des oligonucléotides synthétiques
6. Applications particulières de la PCR
- Rappels
- Diagnostique
- Séquençage
- Modification de fragments d'ADN
- Analyse de mutations ponctuelles
- PCR inverse
- RT-PCR
- PCR quantitative
7. Génie génétique des levures et champignons filamenteux
- Techniques de transformation des levures
- Vecteurs utilisés chez Saccharomyces cerevisiae
- Vecteurs utilisés chez Kluyveromyces
- Levure méthylotrophes (Pichia, Hansenula)
- Sécrétion chez les levures
- Principaux problèmes d'expression de protéines recombinantes chez les levures
- Champignons filamenteux
8. Génie génétique végétal
- Transformation via Agrobacterium tumefasciens et le plasmide Ti
- Méthodes de transformation directes
- Vecteurs dérivés de phytovirus
- Techniques de génétique inverse
- Ingénierie métabolique
- « Protein pharming »
- Production de protéines recombinantes dans les algues vertes unicellulaires
9. Production de protéines recombinantes dans des cellules d'insectes
- Promoteurs
- Vecteurs
- Expression de protéines recombinantes dans les vers à soie
10. Clonage en cellules de Mammifère
- Marqueurs de sélection
- Méthodes de transfection
- Vecteurs dérivés du virus SV40
- Vecteurs Vaccinia
- Vecteurs Alphavirus
- Thérapie génique
- Vecteurs Adenovirus
- Vecteurs Herpès
11. Animaux transgéniques
- Techniques de transfection
- Utilité des animaux transgéniques
- « Dolly » : Multiplication d'un individu par transfert de noyau somatique dans un ovule énucléé
12. Introduction aux législations en matière d'expérimentation et de mise sur le marché d'OGM |
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Acquis d'apprentissage (objectifs d'apprentissage) du cours :
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- Acquisition de connaissances de base sur les techniques de transgenèse.
- Appréhension des potentialités du génie génétique dans l'étude du fonctionnement des organismes,
ainsi que dans l'amélioration des espèces utilisées par l'homme et pour la production de protéines recombinantes.
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Prérequis et corequis / Modules de cours optionnels recommandés :
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| Biologie moléculaire et génétique (cours de bachelier en biologie). |
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Activités d'apprentissage prévues et méthodes d'enseignement :
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| Les travaux pratiques sont intégrés dans les "Stages ou travaux pratiques intégrés (y compris séminaires)"(SSTG0009-1). |
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Mode d'enseignement (présentiel ; enseignement à distance) :
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| Cours durant le premier quadrimestre. |
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Lectures recommandées ou obligatoires et notes de cours :
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| Présentations Powerpoint et notes de cours (partielles) mises à la disposition des étudiants via la plateforme WebCT . |
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Modalités d'évaluation et critères :
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| Examen écrit en première comme en seconde session. |
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Contacts :
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| - Prof. J. Dommes (j.dommes@ulg.ac.be) |
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| Notes en ligne : |
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| Supports disponibles sur la plateforme eCampus |
| Notes de cours et présentations PowerPoint |
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